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革蘭氏染色的注意事項,革蘭氏染色的注意點

  • 生活
  • 2023-05-05 16:51

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革蘭氏染色需要注意哪些問題為什么

1、革蘭氏染色成敗的關鍵是酒精脫色。如脫色過度,革蘭氏陽性菌也可被脫色而染成陰性菌;如脫色時間過短,革蘭氏陰性菌也會被染成革蘭氏陽性菌。脫色時間的長短還受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影響,難以嚴格規定。

2、染色過程中勿使染色液干涸。用水沖洗后,應吸去玻片上的殘水,以免染色液被稀釋而影響染色效果。

3、選用幼齡的細菌。G+菌培養12h-16h,E.coli培養24h。若菌齡太老,由于菌體死亡或自溶常使革蘭氏陽性菌轉呈陰性反應。

擴展資料:

在實驗中經常會出現假陽性和假陰性的結果,假陽性主要是由于脫色不完全,可能是由于涂片過厚,或者是結晶紫染色過度,導致脫色不完全。假陰性可能是因為細胞固定過度,造成細胞壁通透性的改變,而出現假陰性結果;另外,細胞培養時間太長,可能已經有部分細胞發生死亡或者自溶,也導致細胞壁通透性的改變而出現假陰性結果,

參考資料來源:百度百科-革蘭氏染色

革蘭氏染色注意事項

1、選用活躍生長期菌種染色,老齡的革蘭氏陽性細菌會被染成紅色而造成假陰性。

2、涂片不宜過厚,以免脫色不完全造成假陽性。

3、脫色是革蘭氏染色是否成功的關鍵,脫色不夠造成假陽性,脫色過度造成假陰性。

什么是革蘭氏染色法?染色過程應注意什么

革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,1884年由丹麥醫師、細菌學家漢斯·克里斯蒂安·約阿希姆·革蘭氏(HansChristianJoachimGram,1853-1938)創立。革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟。

注意事項:

1.選用活躍生長期菌種染色,老齡的革蘭氏陽性細菌會被染成紅色而造成假陰性。

2.涂片不宜過厚,以免脫色不完全造成假陽性。

3.脫色是革蘭氏染色是否成功的關鍵,脫色不夠造成假陽性,脫色過度造成假陰性。

***原理:

用于生物染色的染料主要有堿性染料、酸性染料和中性染料三大類。堿性染料的離子帶正電荷,能和帶負電荷的物質結合。因細菌蛋白質等電點較低,當它生長于中性、堿性或弱酸性的溶液中時常帶負電荷,所以通常采用堿性染料(如美藍、結晶紫、堿性復紅或孔雀綠等)使其著色。

酸性染料的離子帶負電荷,能與帶正電荷的物質結合。當細菌分解糖類產酸使培養基pH下降時,細菌所帶正電荷增加,因此易被伊紅、酸性復紅或剛果紅等酸性染料著色。中性染料是前兩者的結合物又稱復合染料,如伊紅美藍、伊紅天青等。

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